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以后出现了路易斯·巴斯德。他是一位素有声望的教师、物理学家和化
学家。他在巴黎师范学校通过一次典型的实验证明,哪怕是最小生命也不会
自然发生传染病,而是在实验中染上了可怕的病菌。
巴斯德认为,患炭疽病动物的血液中的透明杆菌是炭疽病病原。但他没
有充分的理由证明这一点。当时有不少研究人员激烈地反对,他们认为这种
奇异的形体是晶体或炭疽病造成的分解物。
科赫首先提出第一个问题:这种不同寻常的形体需要无一例外地在每一
种炭疽病血液中证实吗?好像事先约好的一样,几天以后一位忧伤的农民来
找科赫,他说他的六七头最好的奶牛患传染病死掉了。科赫博士把在他这儿
就诊的病人打发回家,就匆匆跟随这个农民一起去农场。他把一堆试管都取
满动物的黑色血液,尽力安慰了这个农民,而后才回家。科赫进行了彻底的
检验,但得到的总是同一个结果。
几天后,距此很远的其他地方也传来新的炭疽病消息。科赫又上路了,
又是数小时数小时地坐在显微镜前观察。他在死亡动物的血液中总能发现有
杆菌和链球菌。
于是科赫又提出第二个问题:这些鬼东西会出现在健康动物的血液中
吗?屠宰场的师傅马上给他们的医生送来成桶的新鲜畜血。科赫反复观察,
既没有发现杆菌,也没有发现链球菌和“线团”。
科赫给自己提出了第三个问题:感状物是细菌还是病畜血液中的分泌
物?
他的研究没日没夜地进行着。心疼丈夫的艾梅·科赫夫人深知丈夫工作
的意义,她在诊室里挂上一幅巨大的褐色布帘,从而使这位孜孜不倦的学者
在小小的房间里建立起属于自己的实验室,不受干扰地进行工作。
在这些日子里,科赫一次也没有让他的小宝贝女儿格尔特鲁进入过实验
室,这样做是有原因的。
他抓到一只小白鼠 (早在儿童时代科赫就学会了这一手),在白鼠的尾
巴上割开一个小口,注入几滴患炭疽病动物的血液,然后放在一只特制的宠
子里。如果杆状形体是炭疽病菌的话,小白鼠就会像牛、羊、马和森林里的
鹿一样死去。
他彻夜不眠地等待试验结果。第二天早晨,小白鼠四脚朝天一命呜呼。
解剖结果证明肝脏肿大,血液乌黑。显微镜下出现了多次见过的景象:杆状
形体、线团和串珠……
科赫又把这只死小白鼠的一小滴血液注射给另一只健康的小白鼠。他这
样做了30次,得到的都是同样的结果。
罗伯特·科赫对此并不满足,他想亲眼见到杆状形体的生长状况。这又
该怎么做呢?答案是必须做动物体外试验。他先将一把外科手术刀放在酒精
灯上消毒,然后从一只小白鼠身上割取一块染有炭疽病的组织,放在一只摘
下来的牛眼的透明房水里,再把显微镜的载物台的温度调到相当于人体的温
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度。
第二天有一堆杂菌滋生在房水里,试验失败了。最后科赫终于做出了誉
满世界的光辉成就:他在载玻片中间制出凹型小穴,周围涂上凡士林,然后
把一小滴含炭疽病杆菌的液体滴在一张薄玻璃片上,就是所谓的盖玻片,把
它翻过来压在凡士林上,从而使盖玻片的液滴悬在载玻片的穴里,完全密封,
其他杂菌被隔绝在外面。
用这种方法可以观察细菌的活动情况。科赫在显微镜里看到:小棒儿变
稀疏了,伸展开来,彼此分离,逐渐扩散到整个视野。它们活着呢!科赫仍
不满意,这个证据还不是决定性的。如果这些杆状形体真的能引起炭疽病的
话,那么就得在没有细胞混杂,没有其他杂菌的情况下培养,即纯茵培养。
科赫自己动手做了一个培养箱。他把一小丛微生物从一个悬滴移到一种
培养基上,杆状形体增多了,形成了链状和线团体。经过8次接种后,一种
白鼠组织也不能存在了,这一定是培养的炭疽病细菌。科赫把这种菌苗注射
在白鼠、豚鼠和家兔身上,结果所有的动物都染上了炭疽病。
这位深受人们爱戴和尊敬的乡村医生,这些日子曾多次忘记给他的病人
开方子。他不顾患者等候就医,就匆忙到实验室去工作。他废寝忘食,难得
跟妻子谈一次心,也无暇陪伴女儿玩耍,通宵达旦地工作。他没有生病,也
没有感染上致命的炭疽病,这真是个奇迹!
罗伯特·科赫并不急于发表他那成功的试验和论证,因为他认为还有很
大的缺陷,于是他又给自己提出了第四个问题:
炭疽病到底是怎样在自然界中传播的呢?
通过无数次试验,科赫观察到,有时白鼠脾脏中的炭疽杆菌在显微镜下
死掉,就是把细菌再滴到牛眼房水也无济于事,这些细菌再也不能复原了。
给白鼠注射死去的细菌,白鼠也不再死亡。
一天早晨,科赫研究放在培养箱里很久的炭疽病菌悬滴,这些线状细菌
体内也显出斑点和珠状形体。这些大概就是芽抱吧?该怎么判断呢?科赫把
样品放到一边,又去从事注射的研究了。一个月后,他又把已经干燥的样品
拿出来,珠状形体依然存在着。对,的确是炭疽病菌的芽抱!
科赫立即往原来的样品上滴新鲜的牛眼房水,他进行新的试验达数月之
久。他终于弄明白了,炭疽病形成芽抱,这就是延续生存的形式。芽抱不是
在死牛的体内形成的,而是在动物排泄的细菌中形成的。形成芽泡必须具备
一定的条件,例如,地温在15℃以上。芽抱在自然界传播炭疽杆病菌。
研究到了这一地步,科赫决定要发表自己的研究成果,他接受科恩教授
的盛情邀请,来到布雷斯劳,为尊贵的朋友们做实验表演。
科赫详尽地阐述他的论断:“每一种寄生物在任何情况下都会引起疾病。
寄生物不能在其他疾病中出现,而是作为偶然的和非致病的寄居者出现。这
种寄生物最终可以完全脱离寄生体进行纯培养,一定能使试验动物染上类似
的疾病。”
科赫证实了他的论断。这样引起了后来的激烈争论:是不是所有的细菌
都属于唯一的一种类型?像很多研究人员所断言的那佯,或者费尔迪南德·科
恩是对的,因为他早在 1853年就认识细菌植物界,并明显地分为不同的类
别。科恩赞同巴斯德的观点:即“腐烂的原因及其引起很多种疾病的毒素要
到活组织中去找”。这的确是另一个广阔的有待进一步研究的领域……
现在,罗伯特·科赫在布雷斯劳证实时说:
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“首次成功,一种奇异病症的病原学问题弄清楚了。这种疾病既不需要
研究人员费力,也不需要大胆而复杂的假说,根据它对土壤的依赖情况就足
以解释清楚了。显然有必要把炭疽病和炭疽病传染方式相近的疾病做比较,
首先是伤寒和霍乱做比较。希望在进行这些观察的时候,偶然找到以球菌或
类似裂殖菌的形式而存在的伤寒和霍乱菌。我们不应该让那些由于某些疾病
一时还不能被征服而出现的困难所吓倒,允许以此通过试验作为一种手段来
达到目的。只是不应该再像现在这样从最困难的地方开始。而是通过把传染
病的病原学加以详细比较,来搞清楚频繁而又严重地传染给人类的疾病的实
质并能找到可靠的方法来预防这些疾病。”
科赫把他的实验报告发表在费尔迪南德·科恩主编的《植物生物学杂志》
上,题目是《炭疽病病原学:论炭疽杆菌发育史》。
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六、等待机会
科赫返回沃尔施太因之后,为了遵循“永不虚度年华”的诺言,他又开
始了新的研究。他先是着手用一品红、甲基紫和所谓的新褐色为他的细菌染
色,接着用加拿大树胶和醋酸将标本封好,从而达到长期保存的目的。
这些研究成果都写在题为 《细菌的研究、保存和摄影过程》一文中,并
且送到科恩教授�